肉的宰后嫩化关键归因于肌原仟维机构的损害，肌原仟维机构是由内源性球血清淀粉电离酶降解塑料塑料肌原仟维和体血人体内部系骨架球血清发生的。与几百年来向来是关注度焦聚的钙球血清酶不同于，胱天球血清酶（caspases）这两天成了感动手效率来说题。胱天球血清酶在体血人体内部系凋亡的履行时段.起着尤其重要的性的意义，各举caspase-3在死了球血清淀粉电离中的意义是多多面和复杂化的，为此必玩进三步论述。S-亚硝基化凭借转换钙增加、力量分泌、球血清质降解塑料塑料和体血人体内部系凋亡来转换口感，涉及嫩度和持水效率。项目前期论述出现 S-亚硝基化可以再降依赖感情线粒体的caspase-3级联不良反应，这可以是肌肉群体血人体内部系凋亡和牛羊肉高质量转变 的缘由。caspase-3的论述内容是其与体血人体内部系凋亡的感情，但是，特少有论述探究S-亚硝基化转换caspase-3的管理机制。

2024年9月由广州农牧业大学生张万刚先生微商团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱海洋生物为该研究提供了亚硝基化表达组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文字幕主题词：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202多年影响到要素：5.7

发过周期：2024年9月

业主计量单位：南京农业大学

探索相关材料：蛋白

拜谱给出新技术：亚硝基化修饰组学

技術路线图：

一、探索然而

01.Caspase-3活力性

当今尚不模糊NO对caspase-3的限打造用是否是归因于NO介导的S-亚硝基化，有所不同渗透压梯度方向的GSNO成为外源性NO供货，以促进caspase-3的休外S-亚硝基化。最终显示，与找不到GSNO的组好于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3特异性为显著拉低（图1），与原本了解不对。GSNO外理拉低caspase-3特异性的隐藏的问题仍有待于阐述。

图1 不同于含量的GSNO除理对caspase-3渗透性的危害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化地步

探讨Caspase-3的亚硝基化数量，以系统阐述GSNO对Caspase-3的体现性。经GSNO处置后，查重到caspase-3球蛋白S-亚硝基化标准增添（图2）。这种后果是因为，外源性GSNO培训可成功的 成脂caspase-3的休外S-亚硝基化。这令惊喜的是，在不具有GSNO具有的相较比较组中查重到是一个不大的S-亚硝基化带，这是因为caspase-3可能发生了内源性的S-亚硝基化。不仅而且，本探讨中caspase-3的S-亚硝基化数量较高，而caspase-3的生物变低，这与事先的探讨一样。既使，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化呈现位点尚不清理，还必须要进一个步骤的宇宙探索。

图2 GSNO工作对caspase-3S-亚硝基化总体水平的危害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化体现组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。紫色标出的队列标识S-亚硝基化肽，紫色标出的C标识S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3化学降解结蛋白酶

结球血清看作那种关键性的神经细胞核骨架球血清，在维系肌神经细胞核组成部分的组成部分详细性和缩水性这方面起着关键性帮助，研究分析S-亚硝基化caspase-3对结球血清溶解的过敏性极具关键性真正意义。与Std（未用胱天球血清酶-3和GSNO孵育的初始值肌化学人造纤维球血清）组相信，0 μM GSNO组（肌原化学人造纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的详细结球血清分子量差异性减小，显示系统caspase-3对结球血清极具潜在性的球血清溶解力量。在GSNO孵育后，详细结球血清的分子量明显的增高（P < 0.05）。与此同时，当GSNO分子量变高时，详细结球血清的分子量持续性调涨（P < 0.05）（图5）。某些发展显示，SNO遮盖的caspase-3以总体水平依赖于的具体方法调节结球血清的溶解。

图5.S-亚硝基化caspase-3光降解结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3可降解肌钙蛋白酶-T

肌钙蛋清-T (TnT)是原肌球蛋清调高承担腹肌缩小的丝条的需要肌原植物食物食物纤维蛋清。TnT的生物挥发表现是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化水平下，caspase-3对TnT的生物挥发情况报告如图已知6如下图所示，与Std组（包含caspase-3和GSNO的肌原植物食物食物纤维）不同之处，caspase-3组中30 kDa TnT精彩精彩片段特殊增长，揭示caspase-3积极参与了TnT的生物挥发，虽然，caspase-3与GSNO的孵育造成 30 kDa TnT缩减。在100和200 μM GSNO组当中没了检验到严重的差别(P > 0.05)，而当GSNO的酸度到达400 μM 时，该精彩精彩片段特殊极大减少(P < 0.05)。某些发现了揭示了SNO体现的caspase-3对TnT生物挥发的调结帮助。结蛋清和TnT是caspase-3的明感底物，而GSNO进行处理缩减caspase-3的灵渗透性或许造成 肌原植物食物食物纤维蛋清生物挥发系数缩减。上述情况所讲，NO引诱的S-亚硝基化能否依据体现半胱氨酸残基来调高caspase-3的灵渗透性，以求进1步影向力其对结蛋清和TnT的蛋清油脂水解效率，可以影向力羊肉品格。

图6. S-亚硝基化caspase- 3光降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、工作小结

本研发指在研讨S-亚硝基化对caspase-3淡化的危害以及其之后对鸡肉肌原仟维体内吸附的危害。蛋清S-亚硝基化都可以淡化caspase-3的半胱氨酸残基，因而导至caspase-3吸附性降，进那步抑制作用了其对鸡肉肌原仟维蛋清的蛋清淀粉水解力量。

三、拜谱工作小结

理论研究阐述适用了酶活检查测量法，亚硝基化淡化组学阐述，WB等检查测量管理机制，察觉核血清酶酶S-亚硝基化可淡化caspase-3的半胱氨酸残基，这会导致了caspase-3亲水性的降底，齐头并进一点减弱了其对鸡肉肌原人造纤维核血清酶酶的核血清酶酶淀粉水解业务能力。本理论研究阐述为解释一下核血清酶酶质亚硝基化对口感的政策调控管理机制出示半个个新的视距。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、呈现蛋清质组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸型号厂品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total硫化恢复备份、解离巯基，欢迎大家咨询！

考生文献资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663